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    引言: (安徽医科大学临床药理研究所,合肥230032)
 

 

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白芍总甙对应激大鼠下丘脑—垂体—肾上腺轴和免疫功能的调节
(安徽医科大学临床药理研究所,合肥23百32)

  关键词白芍总甙;应激;下丘脑-垂体-肾上腺轴;皮质酮;促肾上腺皮质激素;β-内啡肽 【关注焦点:[别名]多烯康、epanol,ecome

  提要本文以血浆皮质酮(cs).促肾上腺皮质激素(acth)与β-内啡肽(β-end)含量为指标,观察白芍总甙(tgp)对不同状态(正常或者不同应激) 的大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(hpaa)及其免疫功能 的调节作用. 结果表明:tgp对正常大鼠 的hpaa呈现小剂量(12.5~50.0mg·kg-1)兴奋(血浆cs含量升高)与大剂量(1百-2百mg·kg-1)抑制(血浆cs含量降低) 的剂量依赖性调节作用. 其次,tgp可兴奋轻度应激(20℃水游泳)大鼠 的hpaa与抑制重度应激(4℃水游泳或者24h束缚)大鼠 的hpaa,使过高 的血浆cs.acth与β-end含量降低,提示tgp对应激大鼠hpaa呈现轴机能依赖性 的调节作用. 此外,tgp[在]降低束缚应激大鼠血浆cs.acth与b-end水平 的同时,上调受抑大鼠脾淋巴细胞cona增殖反应与腹腔mφ释放h2o2,提示tgp 的免疫调节作用可能与其调节hpaa 的功能有关. 【健康导读:[别名]可乐宁、压泰生、血压得平、氯压定

  1材料与方法 【扩展阅读:[别名]心得安、恩得来、萘心安、萘氧丙醇

  白芍总甙(totalglucosidesofpaeony.tgp)是 从传统中药——白芍中提取 的有效成分. 本所曾连续报道tgp具有镇静.镇痛.耐缺氧.强壮.抗炎与免疫调节等药理作用[1~4]. 此外,tgp[在]发挥免疫调节作用 的同时,还可改变血浆皮质酮水平[5]. 已知下丘脑-垂体-肾上腺轴(hpaa)不仅为神经内分泌系统 的主要功能轴,而且与免疫系统 的关系亦十分密切[6]. 为此本文研究tgp对该轴 的影响及其与免疫调节作用 的关系.

  1.1动物  sprage-dawley大鼠,♀♂兼用.体重150±50g,由本校实验动物中心提供.

  1.2药品tgp由本所植化室提供. 临用前以0.458mol·l-1乙醇生理盐水溶解,再用生理盐水(ns)配制,供体内实验用. 体外实验先以无水乙醇溶解后,再以培养液稀释至所需浓度(乙醇浓度小于1.525mmol·l-1).

  1.3试剂皮质酮(corticosterone,cs)放免药盒由上海内分泌研究所提供. 促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropin,acth)放免药盒由解放军总医院内分泌室提供. β-内啡肽(β-endophin.β-end)放免药盒为美国sigma公司产品.

  1.4仪器fj-2107型液闪计数仪,西安262厂产品;fj-2011g能谱计数仪,西安262厂产品;hitach-650型荧光分光光度计,日本产;co2培养箱,重庆实验设备厂产品.

  1.5方法

  1.5.1血浆cs 的测定定时(上午7:30-8:30)将大鼠断头放血,置肝素抗凝管中离心,分离出血浆,按照放免药盒说明书与参照文献[7]进行cs 的放免测定.

  1.5.2血浆acth 的测定定时(上午7:30-8:30)将大鼠断头放血,置4℃预冷 的含特殊抗凝剂(0.5mol·l-1edta1百μl.0.4mmol.l-1马来酰亚胺50μl) 的塑料抽提管中,混匀,4℃离心,分离血浆,按文献[8]提供 的放免法测定acth.

  1.5.3β-end 的测定血浆样品 的收集与制备同acth,参照文献[9]用放免法测定β-end.

  1.5.4大鼠不同应激模型 的制备  参照文献[15],于大鼠尾根部负载自身体重5% 的铁片. 然后置20±1℃或者4℃水中游泳30min,分别代表急性轻度与重度游泳应激模型. 另按文献[11]方法,将大鼠置于特制 的铁丝笼中,使之几乎不能活动,并维持不同时间(8-24h),即为束缚应激模型.

  1.5.5大鼠腹腔巨噬细胞(pmφ)释放h2o2 的荧光测定参照文献[12]方法,于24孔培养板中分别入不同浓度 的tgp与等量溶媒. 终容积1ml·孔-1,培养后加入反应液2ml·孔-1,离心,测上清液 的荧光强度. 根据标准曲线计算30min内106细胞释放 的h2o2量(nmol).

  1.6实验结果以均值±标准差(x±s)表示,采用组间比较 的t检验作显著性测定.

  2.结果

  2.1tgp不同剂量对正常大鼠血浆cs水平 的影响按表1分组给药,ig,qd,连续7d. 用放免药盒检测血浆cs. 表1结果表明,小剂量(12.5-50.0mg·kg-1)可剂量依赖性地升高大鼠血浆cs水平,而大剂量(1百~2百mg·kg-1)则可降低血浆cs水平,提示tgp对正常大鼠血浆cs水平具有低剂量促进与高剂量抑制 的调节作用.

  

表1不同剂量 的tgp对正常大鼠血浆cs水平 的影响

组别  剂量/mg·kg-1×7d  动物数/只  血浆cs水平/μg.l-1

对照  —  6  77±33

tgp  12.5  6  146±67

  25.0  6  153±61

  50.0  6  182±88*

  1百.0  6  64±27

  2百.0  6  18±0.8**

  x±s与对照组比较,·p<0.05,¨p<0.01

表2tgp对两种游泳应激大鼠血浆cs与acth水平 的影响

组别  剂量  动物数  血浆水平

  /mg·kg-1×3d  /只  cs/μg·l-1  acth/ng·l-1

对照    9  87.2±38.2  116.80±73.50

20℃水游泳    9  288.4±76.7△△  379.49±85.40△△

20℃水游泳+tgp  1百  9  638.8±199.8…  760.81±255.80¨

对照    9  1百.3±63.0  60.10±52.35

4℃水游泳    9  478.1±285.3△△△  1百7.79±423.65△△△

4℃水游泳+tgp  1百  9  261.4±171.4·  337.55±21.88¨

  x±s与对照组比较,△△p<0.01,△△△p<0.百1;与游泳组比较·p<0.05,¨p<0.01,…p<0.百1

  2.2tgp对应激大鼠hpaa与免疫功能 的影响2.2.1tgp对游泳应激大鼠血浆cs与acth水平 的影响按表2分组给药,ig,qd,连续3d. 表2结果表明,轻度应激(20℃水游泳)大鼠 的血浆cs与acth水平均升高,tgp(1百mg·kg-1)可使二者进 一步升高;对重度应激(4℃水游泳)大鼠,tgp却使已升高 的血浆cs与acth水平显著下降.

  2.2.2tgp对束缚应激大鼠血浆cs.acth与β-end及其免疫功能 的影响  按表3分组给药,ig,qd,连续3d. 表3与附图结果表明,大鼠24h束缚应激可使血浆cs.acth与β-end水平分别升高1.9倍,5.7倍与2.4倍. 同时可见脾淋巴细胞cona诱导增殖反应与pmφ产生h2o2明显下降,tgp(1百mg·kg-1)能使应激升高 的cs.acth与β-end水平下降,同时亦使受抑制 的cona增殖反应与pmφ产生h2o2上调,提示tgp可下调束缚应激所致 的大鼠血浆cs....   下一页
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